聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)產(chǎn)物是指通過特定的引物和酶在模板DNA上進行擴增的DNA片段。這種產(chǎn)物是特定的DNA序列的拷貝,通常由一對引物指導(dǎo)DNA聚合酶沿模板DNA合成。具有廣泛的生物學(xué)應(yīng)用價值,且其純化和分析需要考慮多種因素以確保實驗的準(zhǔn)確性和可靠性。
目前主流的實時熒光定量PCR(QuantitativeReal-timePCR)方法分為染料法和探針法,染料法以SYBRGreen法為代表,SYBRGreen染料游離時熒光微弱,但但一旦與雙鏈DNA結(jié)合后,熒光大大增強,反應(yīng)管中的熒光強度與反應(yīng)管中雙鏈DNA的數(shù)量成正比例關(guān)系,因此熒光定量pcr實驗步驟可以通過檢測熒光計算反應(yīng)管中產(chǎn)生的雙鏈DNA(PCR產(chǎn)物)的量,但該方法沒有特異性,非特異性擴增的產(chǎn)物也會被計入。